Влияние суппозиториев Простатилена® АЦ на течение экспериментального простатита

Представлены результаты исследования по оценке эффективности нового лекарственного препарата Простатилен^® АЦ (суппозитории ректальные), включающего регуляторные пептиды предстательной железы крупного рогатого скота и комплекс цинка аргинат-глицинат, в лечении простатита. Эксперимент проведен на 40 амбулаторных крысах линии Sprague—Dawley массой тела 180—200 г. Хронический простатит моделировали путем введения 10%раствора димексида в воде в объемном соотношении 4:1.

Показано, что Простатилен^® АЦ оказывает выраженное органотропное противовоспалительное действие, проявляющееся в уменьшении масса простаты, снижении уровня белка в моче, активности кислой фосфатазы, содержания церулоплазмина и С-реактивного белка. Кроме того, способствует нормализации акта мочеиспускания и увеличению суточного диуреза, обладает антиоксидантными свойствами и вызывает повышение уровня мужского полового гормона тестостерона в крови.

Введение. В настоящее время заболевания предста­тельной железы имеют довольно большой удельный вес в структуре урологической заболеваемости, встре­чаются все чаще и характеризуются постоянно возрастающей социальной значимостью. К этой группе забо­леваний относят хронический простатит, аденому и рак предстательной железы, эректильную дисфункцию, мужское бесплодие. Хронический простатит занимает первое место по распространенности среди воспали­тельных заболеваний мужской половой сферы и одно из первых мест среди мужских заболеваний в целом [1].

Трудности терапии хронического простатита опре­деляются разнообразием этиологических факторов, вызывающих патологические изменения со стороны простаты и органов, интегрированных с ней в общую систему кровоснабжения и иннервации. Наиболее значимыми этиологическими факторами в развитии заболеваний предстательной железы являются нару­шения микроциркуляции и конгестивные процессы в ацинусах. Эти факторы приводят к изменению биохи­мических и бактерицидных свойств секрета предста­тельной железы, аутоиммунным реакциям, снижению барьерной функции простаты, что способствует про­никновению инфекции и отягощению течения воспа­ления. При хроническом простатите развивается ряд патологических процессов, затрагивающих различ­ные звенья нервной системы и психоэмоциональной сферы, обусловливая половые расстройства.

Традиционные схемы лечения хронического проста­тита включают применение антибактериальных, спаз­молитических, анальгезирующих и противовоспали­тельных препаратов, витаминов и физиотерапии. Все чаще стали использоваться средства, стимулирующие иммунологическую реактивность организма.

Новым подходом к коррекции нарушений функций предстательной железы является создание лекарствен­ных средств на основе регуляторных пептидов, выде­ленных из предстательной железы крупного рогатого скота. Результаты клинического применения пептид­ных лекарственных препаратов, обладающих органот- ропным действием на предстательную железу (раверон, витапрост, Простатилен®, уропрост), свидетельствуют о высокой эффективности этих препаратов при лечении хронического простатита и аденомы предстательной железы [2-4].

В настоящее время большое внимание в медицинс­кой практике уделяется аминокислотам и микроэле­ментам, обладающим лечебными свойствами.

Известно, что аргинин регулирует функцию мочепо­ловой системы, участвует в сперматогенезе, улучшает эректильную функцию [5, 6]. Глицин обладает имму­нобиологическими свойствами, оказывает глицин- и ГАМКергическое, ai-адреноблокирующее, антиок­сидантное, антитоксическое действия; регулирует деятельность глутаматных (NMDA) рецепторов [7, 8]. Важнейшим биологически активным микроэлемен­том, участвующим в регуляции функций предстатель­ной железы и половой системы является цинк [9].

Широта терапевтического действия и фармаколо­гические эффекты пептидов предстательной железы, аргинина, глицина и цинка послужили обоснованием для создания нового комбинированного лекарствен­ного препарата для лечения заболеваний предстатель­ной железы.

Специфическую фармакологическую активность Простатилена^® АЦ суппозитории изучали в сравнении с препаратом Витапрост (ОАО “Нижфарм”, Нижний Новгород, Россия) на модели ирритативного проста­тита, вызванного ректальным введением смеси 10% димексида со скипидаром [10].

Простатилен^® АЦ (ЗАО “МБНПК “Цитомед”, Россия), выпускаемый в виде ректальных суппози­ториев, включает комплекс регуляторных пептидов предстательной железы крупного рогатого скота и комплекс цинка аргинил-глицинат (H17N504Zn), представляющий собой хелатное соединение цинка и аминокислот аргинина и глицина. В состав лекарс­твенной формы также входят вспомогательные вещес­тва: парафин жидкий и витепсол.

Целью данной работы явилось изучение эффектив­ности применения Простатилена^® АЦ при эксперимен­тальном простатите.

Материалы и методы. Экспериментальное иссле­дование выполнено на 40 аутбредных крысах-самцах линии Sprague-Dawley с массой тела 180-200 г. Животные были разделены на 4 группы по 10 крыс в каждой: интактные животные (1-я группа), контроль (простатит, 2-я группа), простатит+препарат сравне­ния витапрост (3-я группа), простатит+Простатилен^® АЦ (4-я группа).

Хронический простатит моделировали путем введе­ния 10%-го раствора димексида в воде, смешанного со скипидаром в объемном соотношении 4:1 [10]. Перед введением смесь встряхивали в течение 1 мин до образования мелкодисперсной эмульсии. Животных фиксировали в горизонтальном положении рукой в холщовой перчатке. Полученную свежеприготовлен­ную эмульсию вводили крысам ректально на глубину 20-25 мм в объеме 1 мл с помощью устройства для ректальных вливаний (дозатора), обеспечивающего атравматичность процедуры.

Изучаемые препараты вводили крысам через 28 дней от момента моделирования заболевания в течение 30 дней индивидуально в расплавленном виде с помощью атравматического зонда в следующих дозах: витапрост 120 мг/кг, Простатилен^® АЦ 190 мг/кг.

Дозы препаратов рассчитывали по готовой лекарс­твенной форме, исходя из максимальной суточной для человека, с учетом коэффициентов переноса доз на грызунов.

Определяли изменение уродинамики (по показате­лям спонтанного суточного диуреза), используя индивидуальные обменные клетки фирмы “Techniplast” (Италия). Оценивали фоновые значения диуреза (через 28 дней от момента моделирования простаты) и пока­затели по окончании терапии (58-59 дней).

В суточной моче определяли уровень экскретируемо- го белка с помощью количественного метода турбодиметрии [11].

После сбора мочи в обменных клетках крыс подвер­гали мгновенной декапитации под легкой фторотановой анестезией. Забор крови осуществляли в вакуум­ные пробирки с активатором свертывания “Vacutest SER” (“Vacutestkima”, Италия). Пробы прогревали 30 мин при 37°С в термостате, охлаждали 1 ч в холо­дильной камере, центрифугировали при 2050 об/мин.

Сыворотку крови отделяли в пробирки Microtubes Eppendorf (“Plastibrand”, Германия).

В сыворотке крови определяли уровни тестостерона (методом иммуноферментного анализа, наборы фирмы “ХЕМА”), оксида азота (NOx, методом фотометрии Грисса при 520 нм), тиобарбитуратреактивных про­дуктов (ТБК-РП) – малонового диальдегида (методом фотометрии при 537 нм) и гидроперекиси липидов, С-реактивного белка (СРБ, методом иммунофермент­ного анализа, наборы фирмы “BD”), церулоплазмина (методом фотометрии Ревина), активность проста­тической кислой фосфатазы (методом кинетической фотометрии, набор фирмы “Ольвекс Диагностикум”).

Для гистологического исследования использовали вентральную часть предстательной железы, которую фиксировали в 10% нейтральном формалине и после стандартной проводки через серию растворителей заливали в парафин. Срезы тканей толщиной 5-7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином.

Для оценки выраженности простатита в различ­ных группах была разработана следующая 5-балльная шкала: 1 балл – мелкие очаги фиброза, интерстициаль­ной лимфоцитарной и гистиоцитарной инфильтрации; 2 балла – очаги хронического простатита с воспали­тельной инфильтрацией (в основном интерстициаль­ной), занимающие менее 1/4 среза железы; 3 балла – очаги простатита с крупными воспалительными инфильтратами вокруг протоков, ацинусов и крове­носных сосудов со скоплением лейкоцитов в просветах желез, занимающие 1/4-1/2 среза железы; 4 балла – выраженный простатит, захватывающий 1/2-3/4 среза железы; 5 баллов – резко выраженный простатит с поражением более 3/4 среза железы.

Статистическую обработку данных проводили с помощью стандартного пакета программ Microsoft Excel. Достоверность изменений оценивали, используя t-критерий Стьюдента.

Результаты и обсуждение. В ходе исследования уста­новлено, что моделирование экспериментального про­статита сопровождалось развитием значимых измене­ний диуреза у крыс через 28 сут от момента введения флогогена (табл. 1).

Введение смеси скипидара с димексидом провоци­ровало развитие простатита, что сопровождалось сни­жением диуреза за счет воспалительного увеличения массообъемных показателей железы. Во всех опытных группах суточный диурез через 28 дней после модели­рования простатита был снижен более чем на 40%.

Кроме того, отмечалось существенное увеличение протеинурии (в 5,4 раза), что объясняется выходом воспалительного экссудата в просвет уретры самцов и попаданием его компонентов в мочу.

По мере прогрессирования и нарастания тяжести простатита в контрольной (2-й) группе усугублялись нарушения диуреза и увеличивалось количество выде­ляемого с мочой.

На фоне введения витапроста у животных 3-й группы происходило существенное снижение протеинурии и восстановление диуреза по сравнению с фоном МП. Простатилен^® АЦ также способствовал восстанов­лению диуреза и уменьшению суточного выделения белка с мочой (см. табл. 1).

При оценке активности воспаления в ткани пред­стательной железы было установлено, что введение флогогена сопровождается активацией процессов перекисного окисления и развитием нитрозативного стресса, лежащих в основе повреждения мембран кле­ток железы.

На фоне патологического процесса происходило уве­личение выброса тканевого изофермента кислой фос­фатазы – основного маркера простатита и аденомы.

Уровень оксида азота увеличивался в контроле в 2,2 раза, что характеризовало вклад нитрозативного стресса в механизм формирования хронического про­статита. Данный показатель также часто определяется в высоких значениях при других заболеваниях органов урогенитального тракта.

Липопероксидация сопровождалась увеличением концентрации ТБК-РП: в контроле – в 2,4 раза по сравнению с таковым у интактных крыс самцов.

Терапия витапростом способствовала уменьшению выраженности оксидативных процессов в железе, что проявлялось значимым снижением уровня как окси­да азота, так и ТБК-РП по сравнению с контролем. Введение крысам Простатилена^® АЦ оказывало сопос­тавимое с витапростом действие на выраженность оксидативного стресса (табл. 2).

Активность воспаления в клинике часто оценивают по уровню белков острой фазы, к которым относятся два наиболее часто определяемых протеина – церуло­плазмин и СРБ.

В условиях моделирования хронического хими­ческого (ирритативного) простатита было отмечено достоверное увеличение уровня церулоплазмина (в 2,4 раза) и СРБ (в 2,2 раза) (табл. 3).

Терапия сравниваемыми препаратами спобствовала нормализации данных показателей, что характеризо­валось уменьшением выраженности воспаления в про­стате или переходом активного воспаления в стадию ремиссии.

В 3-й группе, получавшей витапрост, содержание церулоплазмина и СРБ уменьшилось в 2,2 и 1,6 раза соответственно, в 4-й группе животных, получавших Простатилен^® 1,8 раза соответственно (см. табл. 3).

Во 2-й группе развитие простатита сопровождалось значимым увеличением содержания фракции кислой фосфатазы из предстательной железы (в 3,5 раза) и снижением продукции мужского полового гормо­на – тестостерона (в 1,9 раза) по сравнению с интак­тными самцами крыс. На фоне терапии витапростом (3-я группа) отмечалось достоверное снижение выхода простатического изофермента кислой фосфатазы (в 1,7 раза) и увеличение уровня тестостерона по сравнению с контролем. Влияние Простатилена^® АЦ на активность простатической кислой фосфатазы по сравнению с витапростом было более существенным, а на содержание тестостерона, напротив, менее значимым (табл. 4).

В связи с тем что простатит приводит к воспали­тельному увеличению массо-объемных размеров вентральной простаты, при оценке влияния лекарственных препаратов на течение простатита учитывают массу железы.

Увеличение размеров железы происходило в основ­ном за счет отека и гиперемии ткани железы. Эти изменения существенно ухудшают уродинамику при пассажах мочи и являются основным фактором развития гиперрастяжения стенки мочевого пузыря больных с простатитом и аденомой предстательной железы, а также причиной расстройств мочеиспускания, в том числе его болезненность.

Во 2-й группе крыс регистрировали значимое уве­личение массы простаты по сравнению с интактными животными (в 1,48 раза) и индекса изменения массы (табл. 5).

Терапия изучаемыми препаратами в течение 1 мес. способствовала нормализации массы предстатель­ной железы, причем эффект Простатилена^® АЦ ока­зался значительно более выраженным (см. табл. 5). Результаты полуколичественной оценки выраженнос­ти морфологических изменений в строении вентральной части простаты крыс самцов при терапии исследу­емыми препаратами отражены в табл. 6.

Анализ полученных данных показал, что противо­воспалительное действие исследуемого препарата Простатилен^® АЦ более выражено по сравнению с таковым у препарата сравнения витапрост при оценке морфоло­гическими методами.

Заключение. Выявленные в ходе эксперимента фар­макологические свойства Простатилена^® АЦ свидетельствуют о взаимодо­полняющем действии компонентов препарата на единые патогенетические механизмы простатита. Комбинированный препарат, содержащий комплекс цинка, аргинина и глицина, может обладать большей эффективностью при лечении заболеваний предста­тельной железы по сравнению с препаратами, содер­жащими в качестве активного компонента только регу­ляторные пептиды предстательной железы.

Литература: